溫度環(huán)氧乙烷的殺菌作用、滅菌時間、對物品的穿透能力與溫度密切相關(guān)。在一定的范圍內(nèi)，隨著溫度的升高，能增強其穿透力和縮短滅菌作用的時間，環(huán)氧乙烷的殺菌作用加強。溫度的常規(guī)極限通常在44℃一56℃，一般常用的合適溫度為50士3℃。但是當(dāng)溫度高到足以使藥物發(fā)揮作用時，再升高溫度，則殺菌作用亦不再加強。在較高的溫度下(例如50℃一57℃)環(huán)氧乙烷的用量為60mg/L、800mgL/和1500mg/L，其滅菌作用差異不明顯。使用環(huán)氧乙烷滅菌時，通過適當(dāng)?shù)奶岣邷囟?，可以?jié)省孝感環(huán)氧乙烷滅菌用量與縮短滅菌時間。影響溫度的因素有:產(chǎn)品總裝載量(<80%)、堆放、包裝材料及厚度、被滅菌物品的溫度等。同時必須關(guān)注溫度的均勻性，其對滅菌效果也非常重要。

環(huán)氧乙烷濃度滅菌的效果取決于環(huán)氧乙烷的分子碰撞和受滅菌的生物體。因此，在一定范圍內(nèi)，分子越多工藝越有效。用600mg/L環(huán)氧乙烷的滅菌工藝比用300mg/L的工藝大約快一倍，用1200mg/L的工藝比用600mg/L工藝又快一倍。但是工業(yè)上通常不采用低于30mg/L和高于1200mg/L的環(huán)氧乙烷氣體濃度。

環(huán)氧乙烷氣體濃度低于300mg/L，在實際的工藝時間內(nèi)基本不會產(chǎn)生確實有效的、足夠的環(huán)氧乙烷分子。而濃度高于1200mg/L，不但不能縮短工藝的時間，反而增加工藝所需的氣體量。所以，綜合考慮到環(huán)氧乙烷的費用及殘留量等因素，工藝常設(shè)計成較低的環(huán)氧乙烷濃度。400一600mg/L是當(dāng)今常用的條件。環(huán)氧乙烷的濃度可以用間接法或直接法來檢測。間接法可用稱重法和壓力測量法計算其濃度;直接法可直接采樣用氣相色譜及遠紅外分析的方法測得其濃度。

相對濕度被滅菌物品的含水量、微生物本身的干燥程度和滅菌環(huán)境的相對濕度，對環(huán)氧乙烷的滅菌作用均有顯著的影響。通常有以下4種情況:

當(dāng)微生物含水量過高、滅菌環(huán)境濕度低時，水分的滲透方向是向外的，環(huán)氧乙烷不易進入微生物體內(nèi)，則滅菌效果不好;

當(dāng)微生物含水量低于外環(huán)境濕度，而且微生物本身不是十分干燥時，水分向微生物體內(nèi)滲透，環(huán)氧乙烷容易進入，滅菌效果較好;

當(dāng)微生物含水量太高、外環(huán)境濕度也大時，兩者處于高濕度動態(tài)平衡，由于水分太多，環(huán)氧乙烷被稀釋或水解，滅菌效果差，需要提高環(huán)氧乙烷濃度或延長作用時間才能達到滅菌;

若微生物太干燥、外環(huán)境濕度也低，兩者處于低濕度動態(tài)平衡，環(huán)氧乙烷不易穿透微生物內(nèi)部，缺乏烷入。